RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:
1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。
2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。
歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī)。
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深圳項(xiàng)目財(cái)稅合規(guī)銷售方法
具體而言,做到財(cái)稅合規(guī)的三項(xiàng)工作:一、健全內(nèi)部管理制度,規(guī)避稅務(wù)風(fēng)險(xiǎn)構(gòu)建內(nèi)部管理機(jī)制,確保財(cái)務(wù)報(bào)告的可靠性和合規(guī)性,主要是通過(guò)制訂內(nèi)部控制制度和規(guī)章制度,對(duì)各個(gè)部門的職責(zé)和權(quán)限進(jìn)行明確,構(gòu)建出一種行之 。
用友技術(shù)的HRM軟件是一款專注于人力資源管理的軟件,它可以幫助企業(yè)實(shí)現(xiàn)員工信息的管理、薪酬福利的管理、績(jī)效考核的管理等目標(biāo)。該軟件具有多種功能模塊,包括人事管理、薪酬管理、績(jī)效管理等,可以幫助企業(yè)提升 。
在高架橋梁的路橋施工中,為了提高橋路施工的效率,大多需的高架橋梁采用裝配式安裝施工方式,節(jié)省路橋施工現(xiàn)場(chǎng)的空間利用和路橋施工的所需耗時(shí),直接將橋梁搭建安裝于澆筑施工的橋墩之上,操作便捷,施工效率快,在 。
藝人攝影師通常需要為藝人拍攝宣傳照片,這些照片將用于宣傳藝人的音樂(lè)、電影或其他項(xiàng)目。這些照片通常需要在不同的場(chǎng)景下拍攝,例如在攝影棚、戶外或其他特殊場(chǎng)地中。藝人攝影師需要根據(jù)藝人的需求和項(xiàng)目的要求,選 。
全自動(dòng)自過(guò)濾器的特點(diǎn):1、過(guò)濾的精度一般默認(rèn)都是100微米,100--300微米都可以選擇,過(guò)濾面積大,并且納污量高,可以根據(jù)客戶的需求進(jìn)行定做。2、清洗方式簡(jiǎn)單易操作,并且有專門的清洗循環(huán)電子監(jiān)控, 。
在采用智能風(fēng)冷和自冷技術(shù)時(shí),可以讓整流器在低負(fù)載工作條件下,模塊溫升小,模塊散熱風(fēng)扇處于低速運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。在高負(fù)載工作條件下,模塊升溫,模塊升溫超過(guò)55℃,風(fēng)扇轉(zhuǎn)速隨溫度變化線性增長(zhǎng)。風(fēng)扇故障在位檢測(cè),風(fēng) 。
電動(dòng)叉車無(wú)法充電的原因是什么“”電動(dòng)叉車是一種依靠電池動(dòng)力驅(qū)動(dòng)的機(jī)械車輛。由于環(huán)保、操作簡(jiǎn)單、經(jīng)久耐用、性價(jià)比高的特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于各個(gè)行業(yè)。電動(dòng)叉車電池使用久了無(wú)法充電的原因是什么1、檢查電動(dòng)叉車充電 。
石塑地板保養(yǎng)方法:1、要及時(shí)將石塑地板上的雜物清理干凈。2、不能將石塑地板浸泡在水中,如果長(zhǎng)時(shí)間被水浸泡,會(huì)減少地板的使用壽命,清洗是要及時(shí)把水吸干。3、在公共場(chǎng)所,石塑地板磨損比較大,應(yīng)縮短維護(hù)周期 。
冰火板受歡迎的原因是什么呢?1、應(yīng)用領(lǐng)域廣。因?yàn)楸鸢迨且环N建筑材料,對(duì)施工環(huán)境要求不高,任何溫度環(huán)境都可以裝修。整個(gè)施工過(guò)程非常簡(jiǎn)單,可以在很短的時(shí)間內(nèi)輕松完成施工項(xiàng)目。應(yīng)用領(lǐng)域很廣,質(zhì)量很可靠,不 。
你能看見(jiàn)很多普通人展現(xiàn)自己不那么美的一面。而在抖音想火,不說(shuō)美若天仙,較起碼不能丑、不能邋遢。因此,我們會(huì)找顏值比較高的來(lái)做視頻的主角進(jìn)行拍攝。5.跟上熱門挑戰(zhàn)較近抖音新上線了一個(gè)比較熱門的挑戰(zhàn),現(xiàn)在 。
工廠滅蟑螂的效果如何呢?工廠滅蟑螂夏天到了甲由肆虐的時(shí)節(jié),甲由作為四害之一,不只生命力強(qiáng),對(duì)生存環(huán)境的適應(yīng)能力也很強(qiáng),假如不一次性清掃潔凈,那將再次以"野火燒不完,春風(fēng)吹又生"的姿勢(shì)高調(diào)出現(xiàn),真是一股 。